色谱法有很多不同的类型,随着研究人员设计新的方法来改进现有方法并添加新的检测器或技术,新的缩写词会定期出现。但它们基本上都取决于流动相和静止相相互作用时发生的情况。毕竟,色谱是实验室中使用的主要分离科学


但研究人员并不只是希望添加高科技和复杂的电子设备来改进色谱。有时,他们正在寻找一种简单且更具成本效益的解决方案。亲和色谱是用于分离混合物中蛋白质的主要色谱技术之一。研究人员“改进”亲和层析的方法之一是使用染料。


亲和色谱法-自然结合

亲和色谱法是根据蛋白质或蛋白质基团与配体之间的相互作用来分离蛋白质的。配体附着在固定相或色谱基质上。关键是蛋白质和配体之间的相互作用是可逆的,可以通过pH值或其他方法进行控制,从而使不同的蛋白质保持不同的时间。这样可以进行分离。


亲和层析的独特之处之一是它可以根据分子的生物功能或化学结构来纯化生物分子。亲和色谱法可以分离原本难以分离的生物混合物,为所选蛋白质提供高分辨率、高选择性和高容量。


亲和层析的协议很简单:


用亲和配体加载柱

使用流动相应用样品混合物–留出结合时间。

清洗色谱柱以去除非结合生物分子。

使用适当的流动相或通过改变色谱柱条件洗脱所需的生物分子。

收集洗脱样品

染色会更好吗?

亲和色谱法的一个问题是,用于结合柱基质和连接蛋白质的配体可能不稳定、相对不溶且价格昂贵。但研究发现,合成染料可以用作蛋白质的配体。合成染料相对便宜,比其他配体具有更高的容量,并且易于动员,因此可以附着在基质上,然后去除。


染料最初缺乏特异性的情况得到了改善,导致了被称为仿生染料的染料。这些模拟生物配体允许它们附着在基质上并与所需的蛋白质相互作用。本文讨论了色谱技术的发展,Achiral SFC分离塔技术 .