毛细管电泳(CE)是一种广泛应用于生物科学的技术。CE的一些主要用途包括:


DNA指纹-DNA扩增后,可以用毛细管电泳分离。分离可以在一个碱基对的分辨率下进行,并且可以识别单个核苷酸,从而创建高分辨率的DNA图谱。

药物分析-CE用于药物和相关化合物的分析,如毛细管电泳:一种极具吸引力的手性分离技术它的高选择性意味着它可以提供很好的分离分辨率。当分离某些化合物(例如胺)时,CE可以在技术人员选择的pH值下使用非反应性毛细管表面,以实现良好的分离。

蛋白质的特性-由于CE的工作方式,可以将其设置为分离两性分子,如蛋白质,从而进行蛋白质鉴定。两性化合物是可以是酸性或碱性的分子,这可以通过改变CE中使用的溶液的pH值来改变。然后,在动员所有分子通过检测器之前,允许分子迁移到其等电点(分子没有净电荷),从而分离分子。

让我们仔细看看是什么让CE成为一种有利的技术,以及可能的缺点:


解决方案的好处

毛细管电泳中使用的窄管有助于提高技术的分辨率。当样品被引入管中并施加电场时,成分以不同的速度移动,导致分离。使用毛细管的优点是减少了横向扩散效应,并减少了管之间的温差。管子的特性以及技术人员设置的其他特性导致了所谓的塞流,在塞流中,流体的速度在垂直于流体的管子横截面上被认为是恒定的。在塞流条件下,轴向扩散是导致分散的唯一因素,因此CE的分离效率很高。


使用窄毛细管也有助于减少在其他技术(如高效液相色谱法(HPLC))中产生的中出现的带变。在毛细管电泳中,液体沿管道流动的速度在管道中是均匀的。在较宽的管道中,以及在其他技术中使用泵送流时,整个管道的速度不均匀。这被称为层流,在管壁和液体之间的界面处速度较慢,形成了在管中心有凸起的速度剖面。例如,这会导致谱带变宽,并且在HPLC中可以看到更宽的峰。


保持平衡

较小的pH值会影响毛细管电泳中的分子电荷和流动,因此pH值的微小变化对毛细管电泳的影响大于HPLC。与HPLC相比,控制CE中的pH值至关重要,影响pH值的因素很多,包括温度