洗脱液薄层色谱中起着至关重要的作用,将样品带到平板上,并允许分析物成分根据其与固定相的亲和力进行分离。在本文中,我们将深入探讨薄层色谱洗脱液的选择,包括为什么它很重要以及如何选择最佳洗脱液。


洗脱液在薄层色谱中的作用

作为一种基于亲和性的方法,薄层色谱的工作原理是根据组分向薄层迁移的程度来分离组分。吸附层由涂有氧化铝或硅胶的惰性板组成。然后将样品放在平板的一端并进入流动相。


该流动相是一种有机溶剂,也称为洗脱液。这是因为它通过毛细管作用将样品带到薄层上来洗脱样品。然后,成分将根据其与固定相的亲和力从流动相分离,从而在板上的不同点产生斑点。然后可以评估每个成分的保留系数。


洗脱液如何影响分析?

重要的不仅仅是与固定相的亲和力。成分也与洗脱液本身有亲和力。因此,使用高极性洗脱液将产生高保留因子,即组分的移动距离除以洗脱液的移动距离。结果是斑点更靠近洗脱液前沿,在那里它停止向上移动。另一方面,极性较低的洗脱液会使斑点接近基线,因为保留因子较低。


要解决高极性或低极性和保留因子的问题,可以通过在洗脱液中混合不同数量的极性和非极性溶剂来改变洗脱液比率。或者,你可以选择一种不同的洗脱液…


如何选择最佳洗脱液

洗脱液保留因子值的范围为0至1–0,表示极性较低,1表示极性较高。为了获得最佳结果,您希望保留因子围绕0.5的中点旋转–0.15到0.85之间是理想的。A类己烷和乙酸乙酯的1:1混合物是一个共同的起点,可以从中进行调整以增加或减少极性。


薄层色谱法并不是溶剂和洗脱液选择很重要的唯一方法。在亲水作用色谱中,需要将样品溶剂与高有机流动相匹配。本文讨论了这一挑战,“HILIC分析碱性肽水溶液时消除样品溶剂效应” .