如何选择列大小

色谱柱对于任何色谱分析来说都是一个至关重要的设备——当选择右侧列。那么，如何选择列大小？继续阅读我们的解释…

为什么列大小很重要？

大小在科学上并不总是重要的，但对于色谱柱来说确实如此。这是因为列的大小将影响粒子在其中的移动方式、所需粒子的体积以及列中发生反应的方式。

为了给你一个宽泛的概念，窄列具有更高的灵敏度。它们还需要较小的样本量和较少的溶剂。另一方面，色谱柱的直径越大，意味着分析中需要的样品越大，溶剂越多，灵敏度越低。

就长度而言，较短的列将减少总体分析时间，因为解决方案通过它们所需的时间更少。与窄色谱柱一样，它们也减少了溶剂的使用。正如你所料，更长的色谱柱具有相反的效果-增加持续时间和溶剂使用。

综上所述，考虑背压也很重要。机器和立柱只能承受如此大的压力。色谱柱越长越窄，推动流动相通过所需的压力就越大。

那么，我需要哪种列大小？

最终，列的选择取决于各种因素，如使用的粒子数。一个一条建议就是选择一个硅胶填充体积在三分之一到一半之间的柱尺寸。在这种情况下，具体直径和长度可能无关紧要，因为长而窄的色谱柱可能与短而宽的色谱柱具有相同的体积。

另一个因素是正在进行的分析类型。尺寸小于50mm的色谱柱更适合快速分离和筛选，而大于250mm的色谱柱则更适合高分辨率分离。

从直径来看，4mm和4.6mm立柱是一些最常用的立柱。如果您正在寻找更高的灵敏度，则适合使用2.1毫米、1毫米或更小的窄柱。

如果使用了错误的列大小，会发生什么情况？

当选择了错误的列大小时，可能会出现许多问题。这些问题包括系统需要处理的背压过大、分析运行时间过长或结果分辨率差。

另一个是分散。这是注射器和检测器（色谱柱填充床外）之间的峰展宽，这对分辨率有害。本文将更详细地讨论这个问题“分散对快速色谱分离的实际影响” .