色谱法最初是由俄罗斯植物学家Mikhail Tsvet在二十世纪初开发的一种分析工具。如今,它在全球范围内被用作现代实验室中最强大的分析技术之一。想知道混合物成分或某物纯度的化学家、生物化学家、制药技术人员可以使用色谱法。


色谱有几种不同的类型,但全球实验室很少有人认为高效液相色谱是主要类型之一。HPLC现在可能已经有50多年的历史了,让我们简要回顾一下它的过去,看看发生了什么使它保持领先地位。


色谱法分离植物色素

实验室中首次使用色谱法通常要归功于植物学家Tsvet,他使用含有碳酸钙的色谱柱来分离植物色素。他在一篇描述他的工作的论文中使用了色谱法这个术语——彩色书写。直到二十世纪中叶,两位化学家开发了一种色谱法,可以使用固定相和流动相,以及它们对分离氨基酸的吸引力的差异,才发生了很多事情。


接下来开发了气相色谱法,当挥发性混合物需要分离时仍在使用。但是GC的主要缺点是分离大分子或极性分子,这些分子是在生物学和医学中发现的。世界已经为HPLC做好了准备。


高效液相色谱法——始于20世纪60年代

现代高效液相色谱法于20世纪60年代诞生,它的历史刚刚超过50年。正是气相色谱法无法分析大分子,推动了高效液相色谱法的发展。HPLC使用液体流动相携带样品通过含有颗粒的色谱柱-如GC中的固定相。流动相在压力下泵送通过色谱柱,混合物根据样品组分对液相和流动相的吸引力水平进行分离。


HPLC早期开发的系统用于分析有机分子,第一次突破可能是开发了分离维生素B12异构体的系统。不久之后,世界各地的有机化学家开始使用液相色谱法。


更改列的角色

从那时起,高效液相色谱的发展相对缓慢,无论是在硬件方面还是在可以使用的色谱柱方面。一些事态发展是齐头并进的。为了获得更高的分辨率,使用较小的柱粒子。但这意味着塔和系统中的压力增加,因此必须开发更好的泵。随着系统压力的增加,与UHPLC中的高压操作相关的危险也会增加。文章中讨论了一个主题,提高HPLC/UHPL样品吞吐量:在更短的时间内实现更多 .