如何选择正确的色谱柱？

色谱柱的选择是色谱分析的一个关键方面。但考虑到可供选择的范围，这也是最难建议的领域之一。在这篇文章中，我们将对选择专栏时的一些最重要的注意事项提出建议。

它用于什么分离化学？

你需要回答的第一个问题是你将使用哪种分离模式。这包括正常相、反相和尺寸排除HPLC。这将确定所需的列类型。

例如，正相色谱柱包含极性固定相，而反相色谱柱与非极性固定相正相反。这本身取决于所讨论的分析物，例如，反相色谱法更适合分离有机化合物。

立柱尺寸

下一个要考虑的因素是立柱的尺寸，更具体地说，是长度和直径。可以对这些测量值进行操作，以提高分析的速度、灵敏度和效率。这样做还可以减少溶剂消耗，从而随着时间的推移降低成本。

为了给你一个大致的想法，窄柱将提高灵敏度，减少所需的样品量，并减少溶剂消耗。另一方面，更短的色谱柱将缩短分析时间，并减少溶剂的使用，尽管这也会影响分辨率。

作为一个广泛的例子，300mm柱适合高分辨率分离，而150mm柱更适合筛选。然而，这一切必须与背压平衡，背压需要保持在系统的压力能力范围内。长而窄的柱子可能比短而宽的柱子需要更多的力。

颗粒大小

列选择中的另一个变量是粒子的大小。在固定相中，珠子的尺寸通常高达10微米，但也可以小到2微米。使用较小的珠子可以提高分辨率和效率。

然而，如上所述，这需要与背压平衡。如果你的机器将流动相泵入含有较小珠子的密柱中，它可能会被压垮。

同样值得考虑孔径。这是另一个可以控制保留的因素，因此会影响您对列的选择。孔径较小的颗粒具有较大的表面积，增加了保留时间。小分子通常需要8-12纳米的孔径，而较大的分析物的孔径最大可达30纳米。

了解有关列选择的更多信息

有关列选择的更详细讨论，请参阅文章，“µ-柱阵列柱-复杂生物样品分离和表征的创新方法”讨论了µ柱阵列色谱柱的开发，以解决传统填料床色谱柱面临的许多问题。